|
* Numune Alma ve Gönderme.
* Numune Taşıma
* H1N1 Lab. Algoritması
* H1N1 labortuvara örnek gönderme formu.1.2
İNFLUENZA H1N1 (DOMUZ GRİBİ)
Refik Saydam Hıfzıssıhha Merkez Başkanlığı’na Pandemik İnfluenza vakalarında gönderilecek numunelerle ilgili olarak uyulması gerekli kurallar:
Gönderilecek örneklerle ilgili hususlar:
- Laboratuara İnfluenza ve İnfluenza benzeri hastalık oluşturan viruslerin tanısı amacı ile yatan hasta, salgın incelemesi ve sürveyans örnekleri gönderilecektir.Bunun dışındaki örnekler çalışılmayacaktır. Formda bu kısımlar mutlaka işaretlenmiş olmalıdır.
- Bütün örnekler ‘İnfluenza ve İnfluenza Benzeri Hastalık Laboratuar İstem Formu’ ile birlikte gelecek, formu olmayan veya eksik doldurulmuş olan örnekler kabul edilmeyecektir.
- Salgın incelemesi amacı ile gelen örnekler, İl Sağlık Müdürlükleri aracılığı ile hangi birimden (okul, kışla, işyeri vb.) kaç örneklem alındığı (ilk birkaç vaka-en fazla 3) ve o birimde toplam kaç hasta olduğu bilgisini içeren üst yazı ile gelecek; bu bilgileri içermeyen numuneler kabul edilmeyecektir.
- Sürveyans amacı ile İl Sağlık Müdürlükleri aracılığı ile üst yazı ile gelen örnekler (sürveyans dahilindeki illerden haftada 10 örnek, sürveyans dahilinde olmayan illerden haftada 3 örnek) gönderilecektir.
- Örneklerin paketlenmesi ve taşınmasında RSHMB Biyogüvenlik Kuralları uygulanmalıdır. http://www.rshm.gov.tr/images/PAKETLEME.doc
- Ayrıca etiketlenmesi (isim, soy isim, yaş, TC kimlik no vb.) eksik olan, uygun olmayan şartlarda (uygunsuz besiyeri, uygunsuz ısı, uygunsuz taşıma kabı vb) gelen örnekler kabul edilmeyecektir.
Numune Alma ve Gönderme
HMB DSÖ ULUSAL İNFLUENZA MERKEZİ NUMUNE ALMA ve GÖNDERME PROSEDÜRÜ
  
1- Ucu pamuklu eküvyon, tüpün içerisinden çıkarılır (Şekil 1)
2- Nazofaringeal veya nazal sürüntü alınır
3- Örnek alındıktan sonra eküvyon, Viral Transport Medium (VTM) (Kırmızı solüsyon) içeren steril kapaklı tüp içerisine konulur ve eküvyonun sapı üst kısmından kırıldıktan sonra tüpün kapağı kapatılır (Şekil 2)
4- Diğer bir steril eküvyon tüpün içerisinden çıkarılır
5- Bu defa boğaz sürüntüsü alınır, ilk örnek alınan eküvyonun bulunduğu VTM içeren tüpe bırakılır ve eküvyonun sapı üst kısmından kırıldıktan sonra tüpün kapağı sıkıca kapatılır (Şekil 3)
 6- Yani, hastanın hem nazofaringeal/nazal hem de boğaz sürüntü örnekleri FARKLI eküvyon çubukları ile alınmış olur ve AYNI VTM’li tüp içerisine konularak gönderilir, 1 hasta için 1 adet VTM’li tüp ve 2 adet ucu pamuklu eküvyon kullanılır (Şekil 4)
7- Tüpün üzerine mutlaka hastanın adı-soyadı yazılır (Şekil 5)
8- Tüp, dik olacak şekilde, soğuk zincir koşulları sağlanarak ve mutlaka hasta bilgi formu ile birlikte laboratuara gönderilir.
Numune Taşıma
Klinik Örnek Taşıma
Üçlü Paketleme Sistemi:
–Klinik örneği içerir
–Su geçirmez
–Sızdırmaz
–Etiketli
–Emici malzemeye sarılı
•
İkincil kap:
–Su geçirmez
–Sızdırmaz
–Birden çok birincil kap içerebilir
•Üçüncül (dış) kap:
–İkincil katmanı korur
–Dokümantasyonu içerir
–Uyarı işaretleri içerir
Uluslararası birçok ticari üçlü paketleme sistemleri vardır.
–İyi amapahalı.
Yerel olarak üretilen versiyonlar araştırılıyor
–Aynı şartları karşılayan ama daha ucuz olan.
Çoğu tanı örneği 4-8oC arası sıcaklıklarda taşınmayı gerektirir.
•Üçüncül paketleme katmanı termal yalıtım sağlamalı ve birkaç buz aküsü sığacak kadar büyük olmalıdır. •Minimum 4 buz aküsü kullanılmalı –Yer varsa daha çok buz aküsü kullanılmalı Normal koşullarda 2-3 gün soğutma sağlar •Varsa soğuk zincir monitörü kullanılmalı
H1N1 LAB. ALGORİTMASI
Pandemik İnfluenza A H1N1 Laboratuvar Algoritması
- İnfluenza benzeri hastalık şüphesi olan hastalardan örnek alınması ve viroloji laboratuvarına gönderilmesi mevsimsel influenza sürveyansında olduğu gibi gerçekleştirilir.
- Nazofaringeal veya nazal/boğaz sürüntü örnekleri laboratuvarımızca sağlanan eküvyon çubukları yardımı ile alınıp viral transport vasatı içerisine konularak bekletilmeden uygun taşıyıcı kap içerisinde, soğuk zincir ve biyogüvenlik kurallarına uygun ve hızlı bir şekilde laboratuvara ulaştırılmalıdır.
- Ulusal İnfluenza Merkezi ’ İnfluenza ve İnfluenza benzeri hastalık laboratuar istem formu’ eksiksiz olarak doldurulmalı ve form hasta örnekleri ile beraber gönderilmelidir.
- Laboratuvara gelen örnekler uygun hazırlık işlemlerinden sonra İnfluenza virusunun korunmuş gen bölgesi hedef alınarak gerçekleştirilen ve İnfluenza A / Swine H1 virusunu tespit etmeye yönelik Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PCR) ile test edilmektedir.
- İnfluenza A virusu tespit edilip Pandemik H1N1 saptanmayan örneklerde diğer alttipleri belirlemeye yönelik H1, H3 ve H5 primerleri kullanılarak ikinci bir PCR reaksiyonu gerçekleştirilmekte ve İnfluenza A virusunun alltipi tespit edilmektedir.
- RSHMB Ulusal İnfluenza Merkezi’nde İnfluenza ve İnfluenza benzeri hastalık oluşturan viruslerin tanısı Dünya Sağlık Örgütü’nün web sayfasında yer alan real time prosedürüne uygun olarak CDCnin primer ve prob dizileri kullanılarak in house real time PCR ile yapılmaktadır. Ayrıca Pandemik İnfluenza tanısı CDC protokolüne ek olarak (artan talep nedeni ile) verifikasyonu laboratuarımızda yapılmış olan ticari bir sistem ile de yapılmaya başlanmıştır. Ayrıca yine Hıfzıssıhha Bölge Laboratuvarlarında (Adana, İzmir, İstanbul) Pandemik H1N1 tanısı için altyapı, ön hazırlıklar ve gerekli eğitimler tamamlanmış olup dört laboratuarda da niteliği aşağıda belirtilen vakalardan tanı çalışmalar yapılacaktır.
- Ayrıca Pandemik H1N1 pozitif saptanan örneklerden “A/California/04/2009 A(H1N1)” olarak adlandırılan pandemik virusun tam genom sekansı referans alınarak sekanslanması suretiyle virusun genetik karakterizasyonu ve antiviral direnç tespiti yoluna gidilecektir.
Kaynaklar:
1- World Health Organization Guidance to Influenza Laboratories Diagnosing Swine Influenza A/H1N1 Infections of current concern, 25 April 2009.
(http://www.who.int/csr/disease/swineflu/swineflu_guidance_labs_20090425.pdf )
2- World Health Organization Viral gene sequences to assist update diagnostics for swine influenza A(H1N1), 25 April 2009.
(http://www.who.int/csr/disease/swineflu /swineflu_genesequences_20090425.pdf )
|